Primera etapa:
“AISLAMIENTO DE CEPAS FITOPATOGENAS EN
HORTALIZAS”
1.
Colecta en campo de muestras vegetales (hojas enfermas
que reflejen síntomas ´amarillamiento, necrosis, manchas obscuras y micelio´)
SUGERENCIAS: al momento de tomar las muestras, estas
deberán etiquetarse con los datos necesarios para guardarse en bolsas de
plástico e inmediatamente colocarlas en una hielera.
2.
Procesar las muestras en el laboratorio:
-Cortar y macerar muestras vegetales
-Siembra
en placas de Petri con medio de cultivo de Agar Papa Dextrosa.
-Incubación durante 48 hrs a 28°C.
-Aislamiento y purificación de cepas
fúngicas.
3. Pruebas de patogenecidad:
-Siembra de rábano (con suelo estéril y recipientes de
plásticos con capacidad para 2 L)
-Evaluar sintomatología y comportamiento del fitopatógeno:
intensidad de infección, patogenecidad y prevalencia.
4. Taxonomía de cepa (s) Fitopatógenas:
-Determinar a través
de pruebas macromorfológicas y microscópicas las características de las cepas.
-Aplicar las claves de identificación para hongos
Fitopatógenos e identificar.
MUESTREO EN CAMPO PARA EL AISLAMIENTO DE POSIBLES CEPAS
ANTAGONICAS
-Muestreo en campo para toma de muestras de suelo rizosférico
de plantas hortícolas.
SUGERENCIAS:
al momento de tomar las muestras, estas deberán etiquetarse con los
datos necesarios para guardarse en bolsas de plástico e inmediatamente
colocarlas en una hielera.
-Procesar en el laboratorio: Realizar la siembra en medio
PDA, aislarlas y purificar.
-Pruebas de confrontamiento: confrontar las cepas
Fitopatógenas con posibles cepas antagónicas de hongos y/o bacterias.
-Evaluar el grado de inhibición de la cepa antagónica hacia
el fitopatógeno.
-Seleccionar las que dieron positivo al antagonismo.
-Purificación de cepas antagónicas e identificación
taxonómica.
-Confrontación In vitro de cepas antagónicas vs Fitopatógenas
para la evolución de antagonismo en medio de cultivo PDA.
Tercera etapa:
EVALUACIÓN EN INVERNADERO DE LA EFECTIVIDAD E INFECTIVIDAD DE
CEPAS ANTAGÓNICAS VS FITOPATÓGENOS
-Esterilización de sustrato y recipientes (con capacidad de
2kg)
-Desinfección de semillas de rábano con hipoclorito de sodio
al 10% durante 10 min.
-Infección con hongo fitopatógeno
-Inoculación con hongo antagónico
-Evaluación diaria de la evolución del tratamiento
-Cosecha del experimento y evaluación de las variables evaluadas.
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